Cremes adesivos contendo nistatina ou complexo nistatina:ẞ-ciclodextrina para o tratamento da estomatite protética: validação analítica, avaliação biológica e de remoção por escovação

Abstract

A incorporação de nistatina (Nys), livre ou complexada à β-ciclodextrina (Nys:βCD), em cremes adesivos protéticos representa uma alternativa promissora, de fácil aplicação e possível redução do tempo de tratamento da estomatite protética (EP). Este estudo avaliou a liberação de Nys, as propriedades biológicas e a remoção por escovação de um creme adesivo protético (DAC) contendo Nys (DACNys) ou Nys:βCD (DACNys:βCD). O método de quantificação de Nys livre ou complexada por espectrofotometria UV-Vis (305 nm) foi desenvolvido e validado. A liberação de Nys livre ou complexada foi avaliada em células de difusão de Franz (30–480 min), enquanto a fotoestabilidade foi investigada após exposição à radiação UV-C, por meio da quantificação do teor residual de Nys. A atividade antifúngica contra Candida albicans foi determinada por difusão em ágar. A atividade antibiofilme foi avaliada em poliestireno, por XTT e contagem de UFC/mL, e em resina acrílica, por XTT e microscopia eletrônica de varredura (MEV). A citotoxicidade foi determinada em fibroblastos NIH/3T3 (ensaio de MTT). A remoção dos cremes de espécimes de resina acrílica, após os protocolos de higienização, foi quantificada por análise fotográfica padronizada. Os resultados mostraram que DACNys:βCD apresentou maior liberação cumulativa de Nys, com diferença estatística a partir de 360 min (p < 0,0001), atingindo 205,49 µg/cm² em 480 min, comparado a 65,99 µg/cm² para DACNys. Na fotoestabilidade, DACNys:βCD manteve 96,5–99,1% do teor de Nys, enquanto DACNys apresentou degradação progressiva, atingindo aproximadamente 80% na condição exposta e 88% na protegida após 24 h. Ambas as formulações apresentaram atividade antifúngica contra C. albicans (zonas de inibição de 7,71–12,08 mm; p < 0,05), reduziram a atividade metabólica do biofilme em mais de 95% após 3 h e inibiram o crescimento planctônico. Em resina acrílica, DACNys:βCD e DACNys reduziram o biofilme em 79,31% e 76,92%, respectivamente, com alterações estruturais confirmadas por MEV. A viabilidade dos fibroblastos 3T3 manteve-se acima de 70% nas diluições ≥1/640, exceto para DACNys (desde 1/1280). A escovação favoreceu a remoção dos cremes adesivos. Conclui-se que a complexação com β-ciclodextrina aumentou a liberação e a fotoestabilidade da Nys, com melhor perfil de biocompatibilidade em menores diluições. Ambas as formulações apresentaram atividade antifúngica e antibiofilme contra C. albicans e foram removidas por escovação. Por associar a fixação da prótese à ação antifúngica, o creme adesivo apresenta potencial para favorecer a permanência local do antifúngico e aumentar sua substantividade, podendo contribuir para otimizar o tratamento, favorecer a adesão terapêutica e proporcionar maior conforto e aceitação pelos usuários de prótese.

The incorporation of nystatin (Nys), either free or complexed with β-cyclodextrin (Nys:βCD), into denture adhesive creams may represent a promising, easy-to-apply approach for the treatment of denture stomatitis (DS), with the potential to shorten treatment duration. This study evaluated Nys release, biological properties, and removal by brushing of a denture adhesive cream (DAC) containing Nys (DACNys) or Nys:βCD (DACNys:βCD). The UV-Vis spectrophotometric method (305 nm) for quantifying free or complexed Nys was developed and validated. Nys release was evaluated using Franz diffusion cells (30–480 min), while photostability was investigated after exposure to UV-C radiation by quantifying the residual Nys content. Antifungal activity against Candida albicans was determined by the agar diffusion method. Antibiofilm activity was evaluated on polystyrene using the XTT assay and CFU/mL counts, and on acrylic resin using the XTT assay and scanning electron microscopy (SEM). Cytotoxicity was assessed in NIH/3T3 fibroblasts using the MTT assay. Removal of the creams from acrylic resin specimens following different cleaning protocols was quantified by standardized photographic analysis. DACNys:βCD exhibited greater cumulative Nys release, with a statistically significant difference from 360 min onward (p < 0.0001), reaching 205.49 µg/cm² at 480 min, compared with 65.99 µg/cm² for DACNys. Regarding photostability, DACNys:βCD retained 96.5–99.1% of its Nys content, whereas DACNys showed progressive degradation, reaching approximately 80% under exposed conditions and 88% under protected conditions after 24 h. Both formulations exhibited antifungal activity against C. albicans (inhibition zones of 7.71–12.08 mm; p < 0.05), reduced biofilm metabolic activity by more than 95% after 3 h, and inhibited planktonic growth. On acrylic resin, DACNys:βCD and DACNys reduced biofilm by 79.31% and 76.92%, respectively, with structural changes confirmed by SEM. Fibroblast viability remained above 70% at dilutions ≥1:640, except for DACNys, for which this threshold was observed from the 1:1280 dilution onward. Brushing facilitated the removal of the denture adhesive creams. It was concluded that complexation with β-cyclodextrin increased Nys release and improved photostability, with a more favorable biocompatibility profile at lower concentrations. Both formulations demonstrated antifungal and antibiofilm activity against C. albicans and were removable by brushing. By combining denture retention with antifungal activity, the adhesive cream may favor local antifungal retention and increase its substantivity, potentially optimizing treatment, promoting therapeutic adherence, and improving comfort and treatment acceptability among denture wearers.